Université fédérale du Mato Grosso
Le test d'Ames, ou test de mutation inverse bactérienne, introduit par Bruce Ames et son groupe au début des années 1970, est aujourd'hui largement utilisé pour évaluer le potentiel mutagène de composés chimiques.
Dans ce test biologique, différentes souches de Salmonella typhimurium présentent des mutations dans les gènes responsables de la synthèse de l'histidine, par conséquent, ces souches ne peuvent pas produire cet acide aminé essentiel.
Le test d'Ames évalue la mutagénèse de différents types d'échantillons (substances, eau, extraits, aliments, boissons), en étudiant si des mutations qui reviennent à un état "prototrophique" (mutation inverse) peuvent être induites, permettant ainsi à la bactérie de survivre dans milieu sans histidine.
Les souches de bactéries sont étalées sur une plaque de gélose avec une petite quantité d'histidine, ce qui permet aux bactéries de se développer uniquement pendant un temps initial et d'avoir la possibilité de muter. Lorsque l'histidine est consommée, seules les bactéries qui ont muté pour obtenir la capacité de produire spontanément de l'histidine survivront.
Un résultat positif indique que le produit chimique testé est mutagène et peut donc agir comme cancérogène, car le cancer est souvent associé à des mutations génétiques dans les études oncologiques.
Le test d'Ames est considéré comme un test rapide et pratique pour estimer le potentiel cancérigène car les tests standard dans les essais précliniques prennent du temps (2 à 3 ans) et sont plus coûteux.
Bien que les faux positifs et les faux négatifs soient connus, le test d'Ames est toujours considéré comme utile en raison de sa forte corrélation. Selon la ligne directrice 471 de l'OCDE, au moins cinq souches qui se sont avérées fiables et reproductibles entre laboratoires sont requises.
Les souches appliquées sont spécialement construites pour détecter les mutations par décalage de cadre (TA-1537 et TA-1538) ou ponctuelles (TA-1531) afin de récupérer la capacité de synthétiser l'histidine, de sorte que différents mécanismes puissent être identifiés.
Nous avons utilisé la fraction S9 de foie de rat pour imiter les conditions métaboliques des mammifères afin que le potentiel mutagène des dérivés chimiques générés par le système hépatique puisse être évalué.
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